小鼠组织上样量对照


Supriya S 发布于 2020 年 6 月 24 日 03:00:00

当涉及小鼠组织样本时,并不是所有的上样对照蛋白都能均衡表达。例如,小鼠心脏中的 β-actin含量相对较低,小鼠小肠中的 GAPDH 含量相对较低。另外,在某些实验条件下,某些上样对照蛋白的蛋白水平可能会受到影响。 例如,在某些组织中,β-actin mRNA 水平会随着胰岛素治疗而改变。预先进行研究,并确定对样本类型和实验而言最佳的上样对照非常重要。

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主题: 蛋白质印迹法, 辅助试剂

流式细胞术比蛋白印迹更有用的 4 种情况


Chris S 发布于 2019 年 12 月 04 日 03:00:00

蛋白印迹实验可用抗体来检测蛋白并分析它们的表达,但确实有其局限性。流式细胞术也使用抗体,但它可使用荧光来检测和分析每种细胞的蛋白表达。

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主题: 蛋白质印迹法, Flow, 技术

“技术提示”视频:牛奶或 BSA?为蛋白印迹实验选择一种封闭蛋白


Ken B 发布于 2018 年 9 月 05 日 03:00:00

如你的蛋白印迹膜要用 TBST 洗涤三次,则首次洗涤可将计时器设为五分钟。现在该怎么办?当然,你可以在午餐前 30 分钟检查你的邮件或社交媒体。或者,你可以做有益的事情,比如查看某个 CST (Cell Signaling Technology) “技术提示”视频!这是一个新的短视频系列,开发和验证 CST (Cell Signaling Technology) 抗体的科学家们在此提供见解和实验步骤提示。

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主题: 实验步骤, 蛋白质印迹法, 技术, 实验技巧

你准备好转移你的蛋白了吗?湿转移与半干转移


Neha G 发布于 2018 年 4 月 18 日 03:15:00

 你很兴奋地进行一次蛋白印迹实验来检测“你最喜欢的蛋白”。裂解物已制备好,并且已通过 SDS-PAGE 分离出蛋白。现在,是时候将蛋白从凝胶转移到膜上了,你坐下来想 — 用湿转移,还是半干转移呢??或者,作为一名研究生,你比我那时候准备得更好,并且你已经知道了你的下一个步骤,在这种情况下,你很清楚湿转移和半干转移的优缺点。

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主题: 实验步骤, 蛋白质印迹法, 技术, 科学教育

你是否曾疑惑应该如何选择上样对照?


Chris S 发布于 2018 年 3 月 21 日 06:15:00

对于希望给文献中的蛋白印迹数据带来一定合理性的人来说,上样对照让人十分头疼。上样对照有一些明显的标准。第一,实验条件不能改变上样对照蛋白的水平。第二,对照的分子量必须与目的蛋白不同。第三,也是最重要的一点,检测到的上样对照和目的蛋白的信号必须在一个线性范围内,否则你会发现你的条带用尽了也无法进行定量。 

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主题: 蛋白质印迹法

你是否曾想过:我设置的上样对照是否正确?


Ken B 发布于 2017 年 11 月 01 日 03:00:00

你正在收集你所有实验中的数据,并准备在年度进度报告时提交给你的顾问和论文委员会。你有一个有趣的假设,你还有一种经验证可在蛋白印迹实验 (WB) 中检测靶蛋白的抗体。该条带的分子量是正确的,并且靶蛋白的表达正如你预测的那样改变。现在,你知道 — 并且百分之百确定 — 当那张幻灯片出现时,委员会中的某个人将会问有关上样对照的问题。

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主题: 实验步骤, 抗体性能, 蛋白质印迹法, 辅助试剂, 技术

你是否曾想过:磷酸化特异性抗体的真相是什么?


Ken B 发布于 2017 年 7 月 26 日 03:20:00

对未绘制成图的生物信号转导通路进行的早期探索是使用放射性标记磷酸化显影方法进行的。开发出磷酸化特异性抗体来检测和定量蛋白磷酸化,这使研究人员更轻松(减少了要处理的 32P 废物),但解释从这些实验中获得的数据往往需要小心谨慎。

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主题: 抗体性能, 一抗, 蛋白质印迹法, 翻译后修饰, 技术

蛋白质印迹实验失败的成本


Claire S 发布于 2016 年 9 月 14 日 03:00:00


考虑实验室成本并不像研究你最喜爱的信号转导通路那般愉快。但由于很难获得研究经费,这是在挑选用于蛋白质印迹实验的试剂时应该考虑到的问题。务必要记住你的一抗质量很重要,因为整个实验的成败就取决于抗体是否可靠、有特异性且敏感。如果抗体的性能不如预期,那么你的实验有可能会失败……而且如果一个蛋白质印迹实验失败的话,成本可能比你想象的要多。

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主题: 抗体性能, 抗体验证, 蛋白质印迹法, 技术, 可重复性

蛋白质印迹实验失败的成本


Claire S 发布于 2015 年 8 月 13 日 20:13:02


考虑实验室成本并不像研究你最喜爱的信号转导通路那般愉快。但由于很难获得研究经费,这是在挑选用于蛋白质印迹实验的试剂时应该考虑到的问题。务必要记住你的一抗质量很重要,因为整个实验的成败就取决于抗体是否可靠、有特异性且敏感。如果抗体的性能不如预期,那么你的实验有可能会失败……而且如果一个蛋白质印迹实验失败的话,成本可能比你想象的要多。

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主题: 抗体性能, 抗体验证, 蛋白质印迹法, 技术

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