SARS-COV-2 危机期间研究型抗体特异性和可重复性的重要性


Srikanth S 发布于 2020 年 5 月 06 日 15:38:00

在此危机期间,世界各地的医疗保健提供者和研究人员都正在开发 SARS-COV-2 检测方法。检测策略包括采用 PCR 诊断活动性感染(通过检测存在病毒遗传物质的情况)和使用血液检测试剂盒(也称为血清学检测),以跟踪人群中的暴露和可能的免疫力 (1,2,3)。使用这些诊断工具,科学界旨在更好地了解 SARS-COV-2 流行病的规模和轨迹。

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但是,来自牛津的医学教授 John Bell 表示,包括英国和西班牙在内的国际研究界的科学家认为,许多用于评估的血清学抗体检测试剂盒“性能不佳”。贝尔进一步指出,假阴性和/或假阳性太多,导致反映的流行病学数据不准确,包括病毒暴露和可能的免疫力 (1)。在美国,美国国家科学院新发传染病和 21 世纪健康威胁常设委员会成员对特定抗体血清学检测的可靠性和可及性表示关注 (4)。在写给白宫的信中,NAS 科学家指出,当前的抗体检测结果“在进行严格的质控并描述其性能特征之前,应被视为可疑” (4)。 

随着科学界争相开发该病毒的诊断和治疗方法,对检测和试剂进行充分的特征确定、验证并提供一致的、可重复的结果比以往任何时候都更为重要。Cell Signaling Technology (CST) 提供关键试剂(包括专门用于 SARS-CoV-2 组合的试剂)、试剂盒和服务,以支持全世界的传染病研究人员了解病毒的行为、如何阻断病毒以及如何治愈它。CST 的研究人员积极参与科学合作,以了解 SARS-CoV-2 的作用机制,并提供深刻的见解,以了解将在未来疫苗开发中使用的病毒的分子结构。

SARS-CoV-2 研究紧迫且至关重要,在 CST,我们知道对研究型抗体验证和再重复性的需求至关重要。我们没有时间浪费在产生模棱两可结果的试剂上,更没有时间浪费在由于特异性差而失败的实验上。为确保质量、特异性和一致性,CST 遵循抗体验证标志(改编自 Uhlen, M., Bandrowski, A., Carr, S. et al. A proposal for validation of antibodies. Nat Methods 13, 823–827 (2016)). 

每种 CST 开发的抗体均经历苛刻的具体应用的内部验证检测,这种检测根据靶标和各个抗体的需要定制。CST 的方法向来是生产(我们内部生产超过 95% 的商品化产品)并在内部严格验证我们的产品。验证检测可以包括以下各项的组合,因为没有任何一个单独的测定方法可以确定有效性:

1) 二元模型 - 分析一组阳性和阴性表达的细胞系,野生型与遗传或基于 CRISPR 的敲除

2) 范围表达-分析大量具有已知靶标表达水平(高表达与低表达因子)、siRNA 和杂合敲除的细胞系

3) 正交数据 - 通过基于非抗体的分析(包括质谱法)进行验证

4) 多种抗体-使用基于富集的应用(IP、ChIP、ChIP-seq)比较观察到的不同的抗体结合相同靶标的信号,或使用免疫染色应用以证明相同的染色分布或靶标定位

5) 异源表达 - 天然(或突变)靶蛋白异源表达后,在细胞系中评估

6) 补充测定-使用竞争性 ELISA、肽点印迹、蛋白质阵列来确认信号特异性或用抗原肽封闭以消除修饰特异性

此外,CST 提供了大量的重组单克隆抗体组合产品。这些产品提供了卓越的批次间一致性,并确保了稳定的供应,这对于研究人员和医疗保健科学家而言是至关重要的因素。  

与往常一样,研究实验的结果和质量取决于输入,以得到有意义且有影响力的见解。当世界处于危机,最关键的是您能一次又一次地使用可以信赖的试剂,并且它们能按预期工作。确保您使用经过验证的抗体进行研究,可以帮您更快更可靠地了解 (SARS-CoV-2) 病毒性疾病的生物学机制。在 CST,我们有同样的目标:帮助加速和推进检测方法和治疗药物的研发,以采取行动应对健康危机。

参考文献: 

  1. https://www.bloomberg.com/amp/news/articles/2020-04-07/new-test-hopes-dashed-as-u-k-finds-antibody-kits-don-t-deliver
  2. https://www.genomeweb.com/molecular-diagnostics/congressional-leaders-seek-coronavirus-test-information-fda#.XpiS3lNKhTY
  3. https://www.cnn.com/2020/04/14/health/antibody-test-explainer/index.html
  4. https://www.cnn.com/2020/04/14/health/coronavirus-antibody-tests-scientists/index.html

仅供研究使用。不得用于诊断流程。

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