成功的细胞培养的小窍门


Dan D 发布于 2019 年 4 月 24 日 03:10:00

在实验室中培养细胞?遵循这些小窍门将增加您的成功,并帮助您避免浪费时间或避免可怕的细胞污染!

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井然有序: 仅将用于目标细胞系的物质保存在生物安全柜中。这包括基质、锥形管、移液器吸头等。将吸头和基质与在用移液器的手放在生物安全柜的同一侧,并将暂时未使用的所有其他材料推回或移到另一只手的一侧。通过将所有物品从窗框向后放置 4-6 英寸,并将分组的材料分开 10-12 英寸,可以减少发生交叉污染的可能性。这也消除了对样品的交叉/挥动,交叉/挥动也可能造成污染。每次将手或手臂放在打开的瓶子、平皿或烧瓶上时,成千上万的颗粒在空气中盘旋,最终可能会污染您的培养物。尽可能保持特意缓慢的移动。

有关废物的处理也要井然有序: 对预期的废物进行预分类可以更快、更安全地进行清理。放在一个装有少量消毒剂的大容量烧瓶或烧杯中,以收集旧的基质,并在另一个烧杯中放置一些干燥的物品,如移液器吸头和实验室抹布。另一个好主意是将生物危害桶放在外面,但放在安全柜附近以丢弃较大的物品(如 25 ml 血清移液器)。 

做好准备: 比解冻细胞更糟糕的是,意识到您尚未取出接种细胞所需的培养基,或者没有适当地标记平皿或烧瓶。该过程还可能包括完成有关所需处理或稀释的任何数学运算;设置您的笔记本电脑,让其有效跟踪您的每一个进度。任何事先准备都可以减少在实验室工作时犯错或匆忙的可能性。  

不要堆放: 每次尝试将自己限制在生物安全柜中的一个细胞系中。这关系到组织工作,看似可能会极大地阻碍您执行多项任务,但是它减少了生物安全柜中污染或事故的风险。

无菌是关键: 请使用充足的 70% 乙醇清洁您的生物安全柜,如有怀疑,使用越多越好。进入生物安全柜的每个瓶子、平皿或其他材料均应使用 70% 的乙醇正确清洁。记住这一点的一种方法是“喷入、喷出”。进出生物安全柜的所有物品(包括戴手套的手)都应进行消毒。喷雾蒸发或擦去后,继续!这样可以确保不会将任何污染物带到隔着将生物安全柜的内部与外部环境分隔开的窗框上。

开始之前和结束之后,请擦拭生物安全柜。组织培养安全柜环境清洁,但需要注意维护。通常,我们并不是唯一使用该设备的科学家。您应该不想假设这生物柜是洁净的,也不想将脏兮兮的生物柜留给后面使用的人。 

定期深度清洁生物柜。您的实验室可能有清洁组织的轮值表,因此需要定期拆卸安全柜并进行彻底清洁。如果不太幸运,请确保至少定期进行一次深度清洁,以免空间污染。  

最后:不要着急! 享受过程!这似乎是显而易见的一点,但是细胞具有先天的迟滞期。匆忙完成任何过程都可能导致错误,从而阻碍进度,这只会增加项目的“迟滞期”。细胞需要关心,匆忙的过程可能会使它们不高兴。

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