细胞过程:如何评估细胞毒性?


Tamar A. 发布于 2020 年 7 月 08 日 03:00:00

响应外源性刺激而发生的细胞健康变化可以深入了解控制细胞与其环境之间关系的生物学机制,并且可以极大地影响实验结果的解释。这些原因突显了理解细胞毒性并采用测定方法测量其影响的重要性。

20-CEP-15480 细胞毒性艺术

细胞毒性是外源剂破坏或杀死细胞的能力。测量细胞毒性的方法对于确定各种药物对细胞生存力的影响、确保给药期间的安全性以及在细胞死亡是预期结果的情况下鉴定具有治疗益处的化合物(例如靶向杀死癌细胞)是至关重要的。测量细胞毒性的测定方法通常可量化样品中活细胞与死细胞的数量,或评估细胞群中细胞膜的完整性。另外,T 细胞介导的细胞毒性测定法的发展是癌症研究的活跃领域,其目的是测试药理学试剂和细胞因子对免疫细胞靶向和肿瘤细胞破坏的作用。

XTT 分析法是生存力测试的一个主要例子,可用于通过测量细胞代谢活性来评估细胞毒性。在检测期间,黄色四氮唑盐 XTT 在代谢活跃的细胞中被脱氢酶还原成高度着色的甲臜染料。所产生的甲䐶的量与样本中的活细胞成比例。在此方法中形成的甲䐶染料溶于水,可以用分光光度计在波长为 450 nm 处测其吸光值进行定量。

评估细胞毒性的另一种方案是通过传统的免疫组织化学方法或蛋白质印迹法来测量与细胞死亡和细胞凋亡相关的基因的表达。正在进行的细胞死亡的已建立标记物包括裂解的胱天蛋白酶-3 Annexin-V 以及线粒体中的细胞色素 c 的释放。染色实验步骤与通过光学显微镜、荧光显微镜或荧光激活细胞分选(FACS)进行的分析相结合,可用于计算悬浮液或制备的组织切片中细胞群内存活和死亡的细胞数量。

选择合适的方法来测量细胞毒性对于获得可靠的结果至关重要。要考虑的关键点包括:该测定法是否适用于正在研究的实验模型?该方法的敏感性和特异性是什么?该测定法是否确定细胞死亡的根本原因是凋亡的还是坏死的?如何检测和解释结果?

仅供研究使用。不得用于诊断流程。

主题: 细胞生物学

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